十味清瘟汤非临床安全性评价试验项目

竞争性谈判文件

经研究，湖北荆门产业技术研究院有限公司十味清瘟汤非临床安全性评价试验项目以竞争性谈判的方式采购，欢迎符合条件的单位积极参与。

一、项目名称：湖北荆门产业技术研究院有限公司-十味清瘟汤非临床安全性评价试验。

二、采购预算：17万元。超过预算为无效报价。

三、采购内容：十味清瘟汤非临床安全性评价试验等（详见附件）。

四、参与竞争性谈判单位应具备的条件：

1、应具备《政府采购法》第二十二条资格条件；

2、供应商具有药物非临床安全性评价试验等与本项目实验内容相关经营范围；

3、本次采购要求投标人须具备独立法人资格，具有有效的三证合一企业营业执照；

4、在“信用中国”（www.creditchina.gov.cn）网站中未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单，提供查询网络截图件并加盖公章；

5、本项目不接受联合体投标。

五、竞争性谈判文件领取时间

2023年1月9日至2023年1月13日工作时间。

六、竞争性谈判时间、地点

2023年1月16日14时30分在湖北省荆门市东宝区象山大道33号东门栋3-10号（荆楚理工学院南1门大学生创业园西边）。

七、报名文件资料领取地址：湖北省荆门市东宝区象山大道33号东门栋3-10号（荆楚理工学院南1门大学生创业园西边）

八、获取采购文件：网上报名（邮箱地址：342010871@qq.com），凡有意参加报名的供应商将相关资料加盖公章做成PDF格式电子文档上传至邮箱报名；第四条要求的相关证明材料，对报名资料审核无误后以邮件方式发放竞争性谈判文件。

九、联系方式

联系人：杨成雄 18986973168

湖北荆门产业技术研究院有限公司

2023年1月9日

附：中药“十味清瘟汤”非临床安全性评价试验内容

中药“十味清瘟汤”非临床安全性评价试验内容

供试药物毒性实验

一、预实验（预实验报价明细（不计入签单收费））

实验材料：健康 SPF 级 SD 大鼠（雌雄各半，6-8 周龄，180-200 g）6 只；受试物溶媒；供试药物：十味清瘟汤（客户提供，客户提供足够的药量用于实验）

实验分组：实验分为 2 组，空白对照组 2 只，供试药物组 4 只，实验共 6 只。

1）空白对照组（受试物溶媒处理，单次口服给药）（N=2）

2）供试药物组（供试药物处理，剂量：客户提供，单次口服给药）（N=4）

实验步骤：

大鼠适应性饲养 7 天，做好耳标标识和尾号标识，称重并记录，根据体重随机分组。供试药物组大鼠按最大给药量口服供试药物，空白对照组口服等剂量的受试物溶媒，单次给药，给药后连续观察 14 d，评价供试药物的未观察到损害作用剂量（NOAEL），最大耐受剂量（MTD）。

检测指标如下：

1）一般情况观察：口服给药后，每天观察大鼠精神状态、自主活动、毛发、死亡率等情况，总计14次；

2）体重检测：分别于适应性饲养结束检测1次大鼠体重，给药后每周检测2次，处死前检测 1 次大鼠体重变化情况，总计6次；

3）摄食量检测：分别于适应性饲养期间检测1次大鼠摄食量，给药后每周检测 2 次大鼠摄食量变化情况，总计5次；

4）组织病理检测：处死大鼠，取心、肝、脾、肺、肾等组织进行大体观察，多聚甲醛固定，HE染色，显微镜下观察组织病理变化情况。

实验结果：

1、动物饲养（6只，每只21天=适应性饲养7天+给药观察14天）

2、动物给药（6只，单次口服给药）

3、一般情况观察（6 只）

4、体重检测（6 只，每只6次）

5、摄食量检测（6只，每只5次）

6、组织大体观察（6 只）

7、石蜡切片（心、肝、脾、肺、肾组织，6只，每个组织1张）

8、HE 染色（5个组织，6只，每个组织1张）

9、图片分析（5个组织，6只，每个组织1张）

二、正式实验 1：供试药物单次给药急毒实验

实验材料：健康SPF级SD大鼠（雌雄各半，6-8周龄，180-200g）20只；受

试物溶媒；供试药物：十味清瘟汤（客户提供，客户提供足够的药量用于实验）

实验分组：实验分为4组，每组5只，实验共20只。

1）空白对照组（受试物溶媒处理，单次口服给药）（N=5）

2）低剂量-供试药物组（供试药物处理，剂量：客户提供，单次口服给药）（N=5）

3）中剂量-供试药物组（供试药物处理，剂量：客户提供，单次口服给药）（N=5）

4）高剂量-供试药物组（供试药物处理，剂量：客户提供，单次口服给药）（N=5）

实验步骤：

大鼠适应性饲养7天，做好耳标标识和尾号标识，称重并记录，根据体重随机分组。供试药物组大鼠口服低中高剂量-供试药物，空白对照组口服等剂量的受试物溶媒，单次给药，给药后连续观察14d。

检测指标如下：

1）一般情况观察：口服给药后，每天观察大鼠精神状态、自主活动、毛发、死亡率等情况；

2）体重检测：分别于适应性饲养结束检测1次大鼠体重，给药后每周检测2次，处死前检测1次大鼠体重变化情况，总计6次；

3）摄食量检测：分别于适应性饲养期间检测1次大鼠摄食量，给药后每周检测2次大鼠摄食量变化情况，总计5次；

4）组织病理检测：处死大鼠，取心、肝、肾等组织进行大体观察，取病变组织，多聚甲醛固定，HE染色，显微镜下观察组织病理变化情况。

实验结果：

1、动物饲养（20只，每只21天=适应性饲养7天+给药观察14天）

2、动物给药（20只，单次口服给药）

3、一般情况观察（20只）

4、体重检测（20只，每只6次）

5、摄食量检测（20只，每只5次）

6、组织大体观察（20只）

三、正式实验 2：供试药物重复给药毒性实验

实验材料：健康SPF级SD大鼠（雌雄各半，6-8周龄，180-200g）40只；受试物溶媒；供试药物：十味清瘟汤（客户提供，客户提供足够的药量用于实验）

实验分组：实验分为4组，每组10只，每组分2个时间点（给药期、恢复期），

每个时间点5只，实验共 40只。

1）空白对照组（受试物溶媒处理，单次口服给药）（N=5*2）

2）低剂量-供试药物组（供试药物处理，剂量：客户提供，单次口服给药）（N=5*2）

3）中剂量-供试药物组（供试药物处理，剂量：客户提供，单次口服给药）（N=5*2）

4）高剂量-供试药物组（供试药物处理，剂量：客户提供，单次口服给药）（N=5*2）

实验步骤：

大鼠适应性饲养7天，做好耳标标识和尾号标识，称重并记录，根据体重随机分组。供试药物组大鼠口服低中高剂量-供试药物，空白对照组口服等剂量的受试物溶媒，1次/天/只，暂定连续给药4周，给药后大鼠恢复4周。给药期结束后处死一半的大鼠（5只，雌雄均有）、回复期结束后处死剩余一半大鼠（5只，雌雄均有）。

检测指标如下：

1）一般情况观察：分别于给药期每天观察1次，恢复期每周观察2次大鼠精神状态、自主活动、眼睛、毛发、死亡率等情况；

2）体重检测：分别于适应性饲养结束检测1次，给药期、恢复期每周检测2次，处死前检测1次大鼠体重变化情况；

3）摄食量检测：分别于适应性饲养结束检测1次，给药期、恢复期每周检测2次大鼠摄食量情况；

4）血常规检测：取血液，进行血常规检测；

5）凝血四项检测：取血浆，检测凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB）水平变化；

6）血清生化检测：取血制备血清，全自动生化仪检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、总胆红素（TBIL）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、肌酸磷酸激酶（CK）含量，检测方法严格按照试剂盒说明书操作；

7）组织称重：处死大鼠，取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、大脑、睾丸、附睾、卵巢、子宫等脏器称重组织；

8）ELISA检测：取心脏组织，BCA 蛋白定量，ELISA 检测组织中心肌蛋白T（cTnT）、心肌蛋白 I（cTnI）表达水平，检测方法严格按照试剂盒说明书操作；

9）骨髓涂片：处死大鼠，取股骨，采集骨髓，制备骨髓涂片，瑞氏染色，显微镜下进行细胞分类计数。

参考文献：

裴天仙,王晶晶,滕晋莹.酒石酸长春瑞滨对大鼠免 疫和造血系统的长期毒性作用[J].中国药理学与毒理学杂志,2014,28(004):562-568.

10）病理检测：取心、肝、肾组织，多聚甲醛固定，HE 染色，显微镜下观察组织病理变化情况（图片分析方式：文字描述+箭头标注）。

实验结果：

1、动物饲养（20 只，每只 35 天=适应性饲养 7 天+给药、观察 4 周）2、动物饲养（20 只，每只 63 天=适应性饲养 7 天+给药、观察 8 周）

3、动物给药（40 只，口服给药，1 次/天/只，暂定连续给药 4 周）

4、一般情况观察（20 只，每只 28 次）

5、一般情况观察（20 只，每只 36 次）

6、体重检测（20 只，每只 10 次）

7、体重检测（20 只，每只 18 次）

8、摄食量检测（20 只，每只 9 次）

9、摄食量检测（20 只，每只 17 次）

10、血常规检测（40 只，每只 1 次）

11、凝血四项检测（40 只，每只 1 次）

12、生化检测（血清，40 只，8 个指标，重复 1 次）

13、组织称重（12 个组织，40 只）

14、ELISA 检测（心脏组织，2 个指标，见步骤说明）

15、骨髓涂片（股骨，40 只。每只 1 张）

16、瑞氏染色（40 只。每只 1 张）

17、图片分析（40 只，每只 1 张）

18、石蜡切片（心、肝、肾组织，40 只，每只每个组织 1 张）

19、HE 染色（3 个组织，40 只，每只每个组织 1 张）

20、图片分析（3 个组织，40 只，每只每个组织 1 张）

备注：

1.中标公司免费出具可用于正式药效申报所用的中文实验结果分析报告。

2.所有需采购的试剂报价和实验动物的报价依据市场行情会有所调整。

3.如果实验样本需邮寄，请联系销售人员，填好样本信息表。

4.如实验有特殊要求，请提前（签合同的时候）告知我方，否则默认为常规操作。

5.所有样本在实验结束后如无特殊要求只保存 45 天。

6.实验完成后，所有实验结果数据免费保存一年。

7.构建和包装的慢病毒和腺病毒用于实验，不返还给客户。

8.一抗抗体代购时本公司可免费提供相应的二抗及内参抗体，若客户自行提供抗体，需附带提供相应的一抗、二抗和内参抗体。